Abstract
Medicine
Hepatosit karaciğer parenkima hücrelerdir ve sentez ve sistemik enerji homeostazı için gerekli proteinlerin salgılanmasını da dahil olmak üzere birden fazla metabolik işlevleri meşgul. Birincil tetkikine fare karaciğer izole fonksiyonel özellikleri veya karaciğerde meydana gelen değişiklikleri anlamak için değerli bir biyolojik araç oluşturmaktadır. Burada bir iki adım collagenase perfüzyon teknik gerçekleştirerek yalıtım ve birincil fare tetkikine kültürü için bir yöntem tanımlamak ve protein metabolizması soruşturma için onların kullanımı tartışmak. Yetişkin bir fare karaciğer sırayla etilen glikol bis tetraacetic asit (EGTA) ve collagenase, hepatositlerin yoğunluk gradient arabelleği ile yalıtım ardından derin. Bu izole tetkikine kültür tabaklarda uygun ve donatılmış tetkikine özelliklerinin çoğunluğu korumak. Bu tetkikine doğmakta olan protein sentezi radyoaktif olmayan reaktifleri ile de dahil olmak üzere protein metabolizmasının değerlendirmeler için kullanılabilir. Biz izole tetkikine kolayca kontrol edilir ve daha yüksek bir kalite ve hacim istikrar enerji metabolizması için kemoterapi-seçici ligasyonu tepki Tetramethylrhodamine (TAMRA) protein ile kullanarak bağlı protein sentezi oluşturan göstermek algılama Yöntem ve western Blot analizi. Bu nedenle, bu yöntem hepatik doğmakta olan protein sentezi için enerji homeostazı bağlantılı soruşturma için değerlidir. Aşağıdaki iletişim kuralı malzeme ve Yöntemler yüksek kaliteli birincil fare tetkikine yalıtım ve algılama doğmakta olan protein sentezi için özetliyor.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved