Eine anaerobe Biosensor-Test zum Nachweis von Quecksilber und Cadmium

Quecksilber (Hg) Bioverfügbarkeit Mikroben ist ein wichtiger Schritt zu toxischen Hg Biomagnifikation in Nahrungsketten. Cadmium (Cd) Transformationen und Bioverfügbarkeit auf Bakterien steuern die Menge, die in Grundnahrungsmittel sammeln wird. Die Bioverfügbarkeit dieser Metalle ist abhängig von ihrer Speziation in Lösung, sondern vor allem unter anoxischen Bedingungen wo Hg ist, toxische Monomethylmercury (MeHg) methyliert und Cd besteht in der Rhizosphäre. Ganze Zelle mikrobielle Biosensoren geben eine quantifizierbare Signal, wenn eine Metall die Zellflüssigkeit betritt und folglich nützliche Werkzeuge sind, Metall Bioverfügbarkeit zu beurteilen. Leider haben die meisten Biosensoren Bemühungen bisher oxischen Umgebungen durch die begrenzte Fähigkeit der vorhandenen Reporter Proteine Funktion in Abwesenheit von Sauerstoff abhängig gemacht worden. In dieser Studie stellen wir unsere Bemühungen zu entwickeln und zu optimieren eine ganze Zelle Biosensor-Assay funktionstüchtige anaerob, die Metalle unter anoxischen Bedingungen in quasi-Echtzeit und innerhalb von Stunden erkennen kann. Wir beschreiben, wie der Biosensor helfen kann wie chemische Variablen relevant zu den ökologischen Radsport Metalle beeinflussen ihre Bioverfügbarkeit zu beurteilen. Das folgende Protokoll enthält Methoden zur Vorbereitung (1) Hg und Cd-Standards unter anoxischen Bedingungen, (2) Vorbereitung der Biosensor in Abwesenheit von Sauerstoff, (3) Gestaltung und führen ein Experiment, um festzustellen, wie eine Reihe von Variablen beeinflusst Hg oder Cd Bioverfügbarkeit und (4) zu quantifizieren und zu interpretieren Biosensor-Daten. Wir zeigen die lineare reicht von der Biosensoren und geben Beispiele zeigen die Methode Fähigkeit zur Unterscheidung zwischen Metall Bioverfügbarkeit und Toxizität durch die Verwendung von Metall-induzierbaren und konstitutive Stämme.