Laminectomy og vindus kabel i mus

Denne protokollen beskriver en metode for ryggmargen laminectomy og glass vindu implantation for in vivo Imaging av musen ryggmargen. En integrert Digital fordamper er benyttet for å oppnå et stabilt fly av anestesi på en lav-flow rate av isoflurane. En enkelt vertebrale ryggraden er fjernet, og en kommersielt tilgjengelig cover-glass er kledde på en tynn agarose seng. En 3D-trykt plast bakplate er deretter festet til tilstøtende vertebrale pigger ved hjelp av vev lim og Dental sement. En stabiliserings plattform brukes til å redusere bevegelses gjenstanden fra åndedrett og hjerterytme. Denne raske og klemme-fri metoden er velegnet for akutt multi-Foton fluorescens mikroskopi. Representative data er inkludert for bruk av denne teknikken til to-Foton mikroskopi i ryggmargen blodkar i transgene mus som uttrykker eGFP: Claudin-5-et stramt knutepunkt protein.