Abstract
Immunology and Infection
Trods den ekstraordinære smitteevne af hepatitis B virus (HBV) in vivo, hvor kun tre viral genomer kan resultere i en chronicity af eksperimentelt inficerede chimpanser, kræver mest in vitro-modeller flere hundreder til tusinder af viral genomer pr. celle i for at indlede en forbigående infektion. Derudover tillader statisk 2D kulturer af primære humane hepatocytter (PHH) kun kortsigtede undersøgelser på grund af deres hurtige dedifferentiation. Her beskriver vi 3D leveren-on-a-chip kulturer af PHH, enten i monokulturer eller i cocultures med andre nonparenchymal lever-resident celler. Disse tilbyder en betydelig forbedring af at studere langsigtede HBV infektioner med fysiologiske vært celle svar. Ud over at lette stof effekt undersøgelser, toksikologiske analyser og undersøgelser af patogenese, muliggøre disse mikrofluid kultur systemer evaluering af helbredende behandlinger for HBV infektion med henblik på at eliminere kovalent lukket, cirkulær (ccc) DNA. Dette præsenteret metode beskriver opsætning af PHH monokulturer og PHH/Kupffer Co cellekulturer, deres infektion med renset HBV og analyse af vært svar. Denne metode gælder især for vurdering af langtidsvirkningerne af HBV infektion, behandling kombinationer og patogenese.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved