Evaluación de estrés celular y la inflamación en discretos núcleos de cerebro secretoras de oxitocina en la rata Neonatal antes y después de la primera alimentación de calostro

El objetivo de este protocolo es aislar núcleos de ideas ricos de receptores de oxitocina en el cerebro neonatal, antes y después de la primera alimentación de calostro. La expresión de proteínas conocidas para responder al estrés metabólico se midió en aislamientos de núcleos cerebrales mediante Western blot. Esto se hizo para determinar si la insuficiencia de nutrientes inducida por el estrés metabólica en el cuerpo desencadena estrés neuronal. Previamente hemos demostrado que la insuficiencia de nutrientes en los recién nacidos provoca estrés metabólico en el intestino. Además, la oxitocina calostro modula marcadores de autofagia, la inflamación y la respuesta de estrés celular en villi de intestino de rata recién nacido antes y después de la primera alimentación. Señalización de marcadores de proteínas asociados con el estrés del retículo endoplásmico [ER acompañante inmunoglobulina proteína (BiP), traducción en eucariotes iniciación factor 2A (eIF2a) y eIF2a quinasa quinasa proteína R (p-PKR)], así como dos inflamación-señalización proteínas [factor nuclear-κB (NF-kB) y κB inhibidor (IkB)], se midieron en núcleos del cerebro del recién nacido [núcleo del tracto solitario (NTS), núcleo paraventricular (PVN), núcleo supra óptico (hijo), cortex (CX), núcleos del estriado (STR), y núcleo preóptica medial (MPO)] antes de la primera alimentación (sin imprimación por el calostro) y después del comienzo del oficio de enfermera (preparado por el calostro). Expresión de BiP/GRP78 y p-eIF2a era upregulated en unprimed y regulada en tejido preparado de NTS. NF-kB se mantuvo (alto) en el citoplasma CX, STR y MPO, mientras que NF-kB era baja y sin cambios en NTS, PVN e hijo en ambas condiciones. El colectivo BiP y p-eIF2 los resultados son consistentes con una respuesta de estrés. eIf2a se fosforila por kinasa dependiente de dsRNA (p-PKR) en el hijo, CX, STR y MPO. Sin embargo, en las noches (y en menor medida en PVN), eIf2a se fosforila por otra quinasa, control general nonderepressible-2 (GCN2). Los mecanismos de modulación de estrés observados previamente en los enterocitos del intestino del recién nacido parecen espejarse en algunas regiones del cerebro ricas en OTR. El NTS y PVN pueden utilizar un mecanismo de fosforilación diferentes (bajo deficiencia de nutrientes) de otras regiones y refractaria a los efectos de la escasez de nutrientes. Colectivamente, estos datos sugieren que las respuestas cerebrales a la tensión de la escasez de nutrientes se compensan con señalización de enterocitos calostro preparado.