इमेजिंग सेल सांस म्यूकोसा में संपर्क के दौरान इंफ्लूएंजा वायरस के संक्रमण का उपयोग कर दो-फोटॉन Intravital माइक्रोस्कोपी

vivo में सेल-सेल या सेल-रोगज़नक़ इंटरेक्शन का विश्लेषण संक्रमण के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की गतिशीलता को समझने के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण है । दो-फोटॉन intravital माइक्रोस्कोपी (2P-IVM), जबकि छवि अधिग्रहण के दौरान उत्पन्न photobleaching को कम करने, जीवित पशुओं में गहरी ऊतक में सेल बातचीत के अवलोकन की अनुमति देता है । तारीख करने के लिए, लसीकावत् और गैर लसीकावत् अंगों के 2P-IVM के लिए विभिन्न मॉडलों का वर्णन किया गया है । हालांकि, श्वसन अंगों की इमेजिंग पशु के श्वास चक्र से जुड़े आंदोलन के कारण एक चुनौती बनी हुई है ।

यहां, हम एक प्रोटोकॉल का वर्णन करने के लिए vivo प्रतिरक्षा सेल बातचीत में श्वासनली चूहों इंफ्लूएंजा वायरस 2P-IVM का उपयोग कर से संक्रमित के साथ में कल्पना । इस प्रयोजन के लिए, हम एक कस्टम इमेजिंग मंच है, जो शल्य जोखिम और श्वासनली के इंटुबैषेण, श्लैष्मिक उपकला में न्यूट्रोफिल और वृक्ष कोशिकाओं (डीसी) के गतिशील छवियों के अधिग्रहण के बाद शामिल थे विकसित की है । इसके अतिरिक्त, हम श्वासनली में इंफ्लूएंजा intranasal संक्रमण और प्रतिरक्षा कोशिकाओं के प्रवाह cytometric विश्लेषण प्रदर्शन करने की जरूरत कदम विस्तृत । अंत में, हम न्युट्रोफिल और डीसी गतिशीलता के रूप में अच्छी तरह से एक फिल्म के पाठ्यक्रम के दौरान उनके बातचीत का विश्लेषण किया । इस प्रोटोकॉल स्थिर और उज्ज्वल 4d सेल के आकलन के लिए आवश्यक छवियों की पीढ़ी के लिए अनुमति देता है श्वासनली में सेल बातचीत ।