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Biology

O peptídeo de40 MUB para uso na detecção de eventos inflamação mediada por neutrófilos

Published: January 7th, 2019

DOI:

10.3791/58367

1Unité de Pathogénie Microbienne Moléculaire, Institut Pasteur, 2INSERM Unité 1202, Institut Pasteur, 3Institut de Biochimie et Génétique Cellulaires, Université Bordeaux Segalen, 4Unit of Technology and Service Photonic BioImaging, Institut Pasteur

Aqui, nós fornecemos um protocolo que envolve a utilização de MUB40, um peptídeo sintetizado com a capacidade de se ligar a lactoferrina glicosilados armazenada em concentrações elevadas em grânulos específicos e terciários de neutrófilos. Este detalhes de protocolo como MUB40 conjugado diretamente com um fluoróforo pode ser usado para manchar os neutrófilos nos tecidos fixo/permeabilizado, bem como a forma como isso pode ser usado em imagens de viver-pilha a ensaiar para a granulação e ativação de neutrófilos. Métodos de deteção dos neutrófilos são limitados a espécie anticorpos monoclonais, que nem sempre são adequados para determinadas aplicações. MUB40 não penetra a membrana celular e, portanto, é excluído da lactoferrina armazenada em neutrófilos não-ativado/não-permeabilizado. MUB40 tem o benefício adicionado de reconhecer lactoferrina de um leque amplo acolhimento, tornando-se especialmente útil para comparar resultados em estudos envolvendo vários modelos de pesquisa, reduzindo o número de reagentes duplicados e simplificando os protocolos através de coloração de etapa única.

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