Uso di chip microfluidici plastica pre-assemblato per divisione in compartimenti neuroni primari murini

Metodi di microfabbricati a compartimenti stagni di neuroni sono diventati strumenti essenziali per molti neuroscienziati. Questo protocollo descrive l'uso di un chip di plastica pre-assemblato commercialmente disponibile per divisione in compartimenti neuroni hippocampal coltivati del ratto primario. Questi chip di plastica, contenuto all'interno l'impronta di un vetrino da microscopio standard, sono compatibili con alta risoluzione, live e l'imaging di fluorescenza. Questo protocollo viene illustrato come retrogrado neuroni etichetta tramite assoni isolati utilizzando un virus di rabbia modificate che codifica per una proteina fluorescente, creare microambienti isolati all'interno di uno scomparto ed eseguire assotomia e immunocitochimica su chip. I neuroni sono coltivati per > 3 settimane all'interno del chip di plastica, che illustra la compatibilità di questi chip per le culture di un neurone a lungo termine.