Иммунизации взрослых рыбок данио доклинические скрининга на основе ДНК вакцин

За последние два десятилетия возрос интерес к вакцинации на основе ДНК. ДНК вакцинации основан на клонирование последовательности выбранных антиген или сочетание антигенов в плазмиду, который позволяет индивидуальные и безопасный дизайн. Администрация вакцины ДНК в клетки хозяина приводит к экспрессии антигенов, которые стимулируют гуморального и клеточного иммунного ответа. В настоящем докладе описывается протокол для клонирования антигена последовательностей в плазмиду pCMV-EGFP, иммунизации взрослых данио рерио с кандидатами вакцина внутримышечно микроинъекции, и последующего электропорации для улучшения приема. Антигенов вакцины выражаются в виде зеленого флуоресцентного белка (ГПУП)-синтез белков, которые позволяет подтвердить экспрессии антигена под УФ света из живой рыбы и количественная оценка уровня выражения синтез белка с ELISA, а также как их обнаружение с Западный анализ помаркой. Защитный эффект вакцин-кандидатов проверяется путем заражения рыба с Mycobacterium marinum пять недель postvaccination, следуют количественная оценка бактерий с ПЦР через четыре недели. По сравнению с моделями млекопитающих доклинических скрининга, этот метод обеспечивает эффективный метод для предварительного отбора кандидатов Роман на основе ДНК вакцины против микобактериальной инфекции. Метод может применяться для отбора на основе ДНК вакцины против различных бактериальных и вирусных заболеваний.