Gecombineerde genetische en chemische Eiwitmantel wijzigingen van genenoverdracht Adenovirus gebaseerde vectoren voor afscherming en Targeting

Adenovirus vectoren zijn krachtige hulpmiddelen voor genetische vaccinatie en oncolytische een. Nochtans, zijn zij gevoelig voor meerdere ongewenste vector-gastheer interacties, vooral na in vivo levering. Het is een consensus dat de beperkingen opgelegd door ongewenste vector-gastheer interacties kunnen alleen worden overwonnen als gedefinieerde wijzigingen van het oppervlak van de vector worden uitgevoerd. Deze wijzigingen omvatten afscherming van de deeltjes van ongewenste interacties en gericht op de invoering van nieuwe liganden. Het doel van het hier gepresenteerde protocol is om de lezer te genereren afgeschermd en, indien gewenst, retargeted menselijke adenovirus gene transfer vectoren of oncolytische virussen. Het protocol kunnen onderzoekers het wijzigen van het oppervlak van een adenovirus vector capsids door specifieke chemische bevestiging van synthetische polymeren, koolhydraten, lipiden of andere biologische of chemische wordt. Het beschrijft de cutting-edge technologie van wijzigingen van de gecombineerde genetische en chemische Eiwitmantel, die is gebleken om het begrip en het overwinnen van belemmeringen voor in vivo levering van adenovirus vectoren. Een gedetailleerde en becommentarieerde beschrijving van de essentiële stappen voor het uitvoeren van specifieke chemische reacties met biologisch actieve virussen of virus afkomstige vectoren is gegeven. De technologie wordt beschreven in het protocol is gebaseerd op de genetische invoering van (natuurlijk afwezig) cysteïne residuen in oplosmiddel-blootgesteld lusjes van adenovirus afkomstige vectoren. Deze residuen van cysteïne bieden een specifieke chemische reactiviteit die na de productie van de vectoren aan hoge titers voor zeer specifieke en efficiënte covalente chemische koppeling van moleculen van een breed scala aan stof klassen naar de vector kan worden benut deeltjes. Nog belangrijker is, kan dit protocol gemakkelijk worden aangepast voor het uitvoeren van een breed scala aan verschillende (niet thiol-gebaseerde) chemische wijzigingen van adenovirus vector capsids. Tot slot, het is waarschijnlijk dat niet-gehuld virus gebaseerde gene transfer vectoren andere dan adenovirus kan worden gewijzigd vanuit de basis van dit protocol.