Haut débit mesure du temps de Transit intestinale à l’aide de larve Zebrafish

Poisson zèbre sont utilisés comme organismes modèles alternatifs pour la mise à l’essai de la sécurité des médicaments. Le système gastro-intestinal (GI) de poisson-zèbre a des similitudes génétiques, neuronales et pharmacologiques à celle des mammifères. Intolérance gastro-intestinale au cours des essais cliniques de médicaments candidats est courante et peut représenter une menace grave pour la santé humaine. Essais de toxicité de GI dans les modèles précliniques de mammifères peuvent être coûteux en termes de temps, composé d’essai et le travail. La méthode de haut débit présentée ici peut être utilisée pour prédire les problèmes de sécurité GI. Par rapport aux modèles mammifères, cette méthode permet pour une évaluation plus rationnel de test des effets combinés sur le transit de GI pendant l’utilisation de faibles quantités de composés. Dans cette méthode, le poisson-zèbre larvaire (7 jours après la fécondation) sont nourris des aliments contenant une étiquette fluorescente. Après la tétée, chaque poisson larvaire est placé dans un puits d’une plaque à 96-conique-fond-puits et dosé avec la substance d’essai (dissous dans l’eau) ou le véhicule. Transit intestinale est présent, les matières fécales s’accumule au fond des puits, et la vitesse à laquelle cela se produit est surveillée par la mesure de fluorescence du fond du puits à plusieurs reprises au fil du temps à l’aide d’un spectrophotomètre de plaque. La fluorescence de larves dans un groupe donné sont en moyenne et ces valeurs sont représentées graphiquement ainsi que de l’écart-type, pour chaque temps de mesure, ce qui donne une courbe représentant la moyenne transit des aliments dans le temps. Effets sur le temps de transit intestinale sont identifiés en comparant l’aire sous la courbe pour chaque groupe de traitement à celle du groupe imprégnées sur le véhicule. Cette méthode détecté des modifications dans le temps de transit de la GI zebrafish induit par les médicaments ayant des effets cliniques connus de GI ; elle peut être utilisée pour interroger des dizaines de traitements pour des effets gastro-intestinaux par jour. À ce titre, composés plus sûres peuvent être rapidement priorisés pour essais chez les mammifères, qui accélère la promotion 3Rs découverte et profère.