一种用于生物技术相关金黄色葡萄球菌感染活体可视化和内膜分析的斑马鱼胚胎模型

生物材料相关感染 (bai) 是生物技术/医疗器械失效的主要原因。金黄色葡萄球菌是 bai 的主要病原菌之一。目前实验的 bai 哺乳动物动物模型, 如小鼠模型, 成本昂贵, 耗时, 因此不适合高吞吐量分析。因此, 需要新的动物模型作为体内调查 bai 的补充系统。在本研究中, 我们的目标是开发一个斑马鱼胚胎模型, 用于基于荧光显微镜的生物材料存在下细菌感染的体内可视化和体内分析。此外, 还研究了引发的巨噬细胞反应。为此, 我们使用荧光蛋白表达金黄色葡萄球菌和转基因斑马鱼胚胎, 在巨噬细胞中表达荧光蛋白, 并开发了一种单独或与微球一起向肌肉注射细菌的程序胚胎组织。为了监测细菌感染的进展, 随着时间的推移, 我们设计了一个简单而可靠的方法, 显微镜评分荧光细菌。显微镜评分结果表明, 所有具有20多个菌落形成单位 (cfu) 细菌的胚胎都能产生细菌的阳性荧光信号。为了研究生物材料对感染的潜在影响, 我们确定了具有和不具有10μm 聚苯乙烯微球 (ps₁₀) 的金黄色葡萄球菌的 cfu 数, 作为胚胎中的生物材料模型. 此外, 我们使用在 imagej 中运行的 objectj 项目文件 "zbrafan-vapoest" 来量化随着时间的推移有和没有 ps₁₀ 的金黄色葡萄球菌感染的荧光强度。这两种方法的结果表明, 在微球感染的胚胎中, 金黄色葡萄球菌的数量高于在没有微球的胚胎中, 这表明在生物材料存在的情况下, 感染易感性增加。因此, 本研究表明斑马鱼胚胎模型在研究 bai 方面具有应用本文所开发的方法的潜力。