Combinando a coloração histoquímicos e análise de imagem para quantificar o amido no ovário Primordia de doce de cereja durante a letargia do inverno

Alterações em amido em pequenas estruturas estão associadas com eventos chaves durante vários processos de desenvolvimento da planta, incluindo a fase reprodutiva de polinização, a fecundação e o início da frutificação. No entanto, variações em amido durante a diferenciação de flor não são completamente conhecidas, principalmente devido à dificuldade de quantificar o teor de amido nas estruturas particularmente pequenos do primordia a flor. Aqui, descrevemos um método para a quantificação de amido no primordia de ovário de doce de cereja (Prunus avium L.), usando um sistema de análise de imagem anexado para o microscópio, que permite relativas as alterações no teor de amido com as diferentes fases de dormência do Outono à Primavera. Para essa finalidade, o estado de dormência dos botões florais é determinado pela avaliação o crescimento do broto de brotos transferidos para condições controladas em diferentes momentos no tempo de inverno. Para a quantificação de amido no primordia ovário, botões de flores são sequencialmente coletados, fixo, incorporados em cera de parafina, seccionados e manchados com I₂Kl (iodo-iodeto de potássio). As preparações são observadas ao microscópio e analisadas por um analisador de imagem que claramente distingue o amido do fundo. Valores de conteúdo de amido são obtidos através da medição da densidade óptica da imagem que corresponde com a do amido manchado, considerando a soma da densidade óptica de cada pixel como uma estimativa do teor de amido dos quadro estudado.