JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Abstract

Biochemistry

عزل جلوميرولي و في فيفو وسم البروتينات السطحية خلية الكبيبي

Published: January 18th, 2019

DOI:

10.3791/58542

1Department of Nephrology, Medical Faculty, Heinrich-Heine-University, 2Institute of Cellular and Integrative Physiology, University Medical Center Hamburg-Eppendorf

Abstract

بروتينية ناتجة عن تعطيل عامل التصفية الكبيبي الذي يتكون البطانة فينيستراتيد والغشاء الكبيبي، وبودوسيتيس مع أغشية شق بهم. هيكل حساسة لتصفية الكبيبي، لا سيما الشق الحجاب الحاجز، يعتمد على التفاعل بين البروتينات السطحية الخلية المتنوعة. دراسة هذه الخلية البروتينات السطحية كانت حتى الآن محدودة للدراسات في المختبر أو تحليل النسجية. نقدم هنا، بيوتينيليشن مورين في فيفو وسم الأسلوب الذي يتيح دراسة الخلية الكبيبي البروتينات السطحية تحت الظروف الفسيولوجية وباثوفيسيولوجيك. هذا البروتوكول يتضمن معلومات عن كيفية نتخلل الكلي الماوس وعزل glomeruli وأداء إيمونوبريسيبيتيشن الذاتية من بروتين فائدة. كوانتيتيشن شبه خلية الكبيبي السطحية الوفرة متاحة بسهولة مع هذا الأسلوب الرواية، والوصول إلى نضح البيوتين جميع البروتينات ويمكن دراسة إيمونوبريسيبيتيشن. وباﻹضافة إلى ذلك، عزل glomeruli مع أو بدون بيوتينيليشن تمكن مزيد تحليل الكبيبي الجيش الملكي النيبالي والبروتين، فضلا عن ثقافة الخلية الكبيبي الأولية (أي، بودوسيتي الرئيسية الخلية الثقافة).

Explore More Videos

143

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved