Abstract
Biology
Регулирование LDL холестерина поглощения через LDLR-опосредованный эндоцитоз является важной областью исследования в различных основных патологий, включая метаболические расстройства, сердечно-сосудистые заболевания и заболевания почек. В настоящее время существует не доступный метод для оценки поглощения ЛПНП при одновременно мониторинга здоровья клеток. Настоящее исследование представляет протокол, с помощью системы анализа изображений живой клетки, приобрести последовательных измерений ЛПНП притока с параллельного мониторинга здоровья клеток. Этот роман технику испытывается в трех линий клеток человека (печеночная, почечная трубчатых эпителиальных и коронарной артерии эндотелиальных клеток) за 4-часовой курс. Кроме того чувствительность этого метода проверяется с известным ингибиторы, Dynasore и рекомбинантных белков PCSK9 ЛПНП, а также ЛПНП поглощение промоутер, симвастатин. Вместе взятые, этот метод обеспечивает платформу средняя высокая пропускная способность для одновременно скрининг фармакологической активностью, а также мониторинг морфологии клеток, поэтому цитотоксичность соединений, регулирующий приток ЛПНП. Анализ может использоваться с различными системами визуализации и аналитического программного обеспечения.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved