Abstract
Biology
Regleringen av LDL kolesterol upptag via Receptorn-medierad endocytos är ett viktigt område av studie i olika stora sjukdomar inklusive metabolisk sjukdom, hjärt- och njursjukdom. För närvarande finns det ingen tillgänglig metod att bedöma LDL-upptag medan samtidigt övervakas för hälsa av cellerna. Den aktuella studien presenterar ett protokoll, med en levande cell imaging analyssystem, för att förvärva seriella mätningar av LDL tillströmningen med samtidiga övervakning för cell hälsa. Denna nya teknik testas i tre mänskliga cellinjer (nedsatt, renal tubulär epitelial och koronar artär endotelceller) under en fyra timmars tid. Dessutom är känsligheten hos denna teknik validerad med välkända LDL-hämmare, Dynasore och rekombinant PCSK9 protein, liksom en LDL upptag promotorn, Simvastatin. Sammantaget ger denna metod en medium till hög genomströmning plattform för samtidigt screening farmakologisk aktivitet samt övervakning av cellmorfologi, därav cytotoxiciteten hos föreningar reglera LDL tillströmning. Analysen kan användas med olika bildsystem och analytiska programvara.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved