Vaststelling en analyse van Tumor segment Explants als een voorwaarde voor het kenmerkende testen

Organotypic primaire explant weefselcultures, waaronder precisie-cut segmenten, vertegenwoordigen de drie-dimensionale (3-D) weefsel architectuur evenals de meercellige interacties van inheemse weefsel. Weefsel segmenten onmiddellijk gesneden uit vers gereseceerd tumoren behouden ruimtelijke aspecten van de heterogeniteit van de intratumor, waardoor ze nuttig surrogaten van in vivo biologie. Zorgvuldige optimalisatie van weefsel segment voorbereiding en teelt voorwaarden is van fundamenteel belang voor de voorspellende diagnostische mogelijkheden van tumor segment explants. In dit verband zijn lymfkliertest modellen waardevol, zoals deze bieden een consistente stroom van tumor materiaal repliceren en reproduceerbare experimenten uit te voeren. Dit protocol beschrijft het kweken van lymfkliertest Long weefsel tumor afkomstige segmenten met behulp van een roterende incubatie-eenheid, een systeem waarmee intermitterende blootstelling van weefsels aan zuurstof en voedingsstoffen. Onze vorige werk is gebleken dat het gebruik van de roterende incubatie eenheden de levensvatbaarheid van weefsel ten opzichte van andere methoden om cultuur verbetert, met name drijvende segmenten en stagnerende filter ondersteunt. Hier, laten we verder dat segment dikte de levensvatbaarheid beïnvloedt van gekweekte segmenten, suggereren dat optimalisatie met de dikte van het segment gedaan moet worden voor verschillende weefseltypes (HLA). Uitgesproken ITH in relevante oncogene functies, zoals activiteiten, stromale cellen infiltratie of expressie van differentiatie markers, signalering vereist evaluatie van aangrenzende weefsel segmenten voor de expressie van markers gewijzigd door medicamenteuze behandeling of teelt zelf. Kortom, dit protocol beschrijft de generatie van lymfkliertest Long tumor segmenten en hun cultuur op een roterende incubatie-eenheid en toont hoe segmenten moeten systematisch worden geanalyseerd voor de expressie van heterogene weefsel markers, als een voorwaarde voorafgaand aan de drug reactie studies.