JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Biochemistry

إعداد الأقسام الفرعية بلاستيدات الخضراء من نبات لتحليل البروتين التعريب Immunoblotting أو البروتيوميات

Published: October 19th, 2018

DOI:

10.3791/58581

1Université Grenoble Alpes, INRA, CNRS, CEA

Abstract

الجبيلة هي المكونات الرئيسية للخلايا النباتية. هذه للبلاستيده الوفاء بالعديد من الوظائف الحاسمة، مثل استيعاب الكربون والكبريت والنيتروجين، فضلا عن تجميع نواتج الأيض الأساسية. وتتألف هذه العضيات من المقصورات الفرعية الرئيسية الثلاثة التالية. يحيط عضية المغلف، تتميز بالأغشية اثنين، ويتحكم تبليغ البلاستيديه مع مقصورات خلية أخرى. ستروما هي المرحلة القابلة للذوبان في بلاستيدات الخضراء والموقع الرئيسي حيث يتم تحويل ثاني أكسيد الكربون إلى الكربوهيدرات. غشاء ثايلاكويد هو الغشاء الداخلي شبكة تتألف من وجرانة (الأكياس المضغوطة شقة) و lamellae (هياكل أقل كثافة)، حيث يأخذ التمثيل الضوئي أوكسيجينيك. يصف هذا البروتوكول خطوة بالإجراءات اللازمة للتنقية، استخدام سينتريفوجيشنز التفاضلية والتدرجات بركل، من الجبيلة سليمة من نبات، وعن وجود واستخدام التدرجات السكروز، في ثلاثة الأقسام الفرعية (أي، المغلف وسدى ثيلاكويدس). هذا البروتوكول كما يوفر إرشادات حول كيفية تقييم نقاء هذه الكسور باستخدام علامات المرتبطة إلى المقصورات بلاستيدات الخضراء الفرعية المختلفة. الأسلوب الموصوفة هنا قيمة بالنسبة للتعريب سوببلاستيديال للبروتينات باستخدام إيمونوبلوتينج، ولكن أيضا سوبسيلولار والبروتينات سوببلاستيديال وغيرها من الدراسات.

Explore More Videos

140

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved