Immunoblotting या प्रोटियोमिक् द्वारा प्रोटीन स्थानीयकरण के विश्लेषण के लिए Arabidopsis से Chloroplast उप-डिब्बों की तैयारी

Chloroplasts संयंत्र कोशिकाओं के प्रमुख घटक हैं । इस तरह के plastids कार्बन, सल्फर और नाइट्रोजन के रूप में के रूप में अच्छी तरह से आवश्यक चयापचयों के संश्लेषण के आत्मसात के रूप में कई महत्वपूर्ण कार्यों, पूरा । ये organelles निम्नलिखित तीन प्रमुख उप-डिब्बों से मिलकर बनता है. लिफाफा, दो झिल्ली की विशेषता, organelle के चारों ओर और अन्य कोशिका डिब्बों के साथ plastid के संचार को नियंत्रित करता है । स्ट्रोमा chloroplast और मुख्य साइट है जहां कार्बन डाइऑक्साइड कार्बोहाइड्रेट में परिवर्तित हो जाता है की घुलनशील चरण है । thylakoid झिल्ली आंतरिक झिल्ली grana से मिलकर नेटवर्क है (फ्लैट संकुचित sacs) और lamellae (कम घने संरचनाओं), जहां ऑक्सीजन प्रकाश संश्लेषण जगह लेता है । वर्तमान प्रोटोकॉल शुद्धि के लिए आवश्यक कदम से कदम प्रक्रियाओं का वर्णन, विभेदक केंद्रापसारक और Percoll ढाल का उपयोग, Arabidopsisसे बरकरार chloroplasts की, और उनके अंश, सुक्रोज ढाल का उपयोग, तीन में उप डिब्बों (यानी, लिफाफा, स्ट्रोमा, और thylakoids) । इस प्रोटोकॉल भी विभिंन chloroplast उप डिब्बों से जुड़े मार्करों का उपयोग कर इन अंशों की शुद्धता का आकलन करने के लिए कैसे पर निर्देश प्रदान करता है । यहां वर्णित विधि immunoblotting का उपयोग प्रोटीन के subplastidial स्थानीयकरण के लिए मूल्यवान है, लेकिन यह भी उपसेलुलर और subplastidial प्रोटियोमिक् और अंय अध्ययनों के लिए ।