Tilapia Gölü virüs kullanarak geleneksel RT-PCR ve SYBR yeşil RT-qPCR

Bu yöntem, Tilapia Gölü virüs (TiLV) hızlı, hassas ve belirli algılama tilapia dokularda kolaylaştırmak için amaçtır. Bu iletişim kuralının bir parçası olarak gözetleme programlarının, Biyogüvenlik önlemleri TiLV temel araştırma laboratuarlarında kullanılabilir. Altın standart virüs teşhis genelde virüs yalıtımı gibi ters transkripsiyon polimeraz zincir tepkimesi (RT-PCR) daha fazla doğrulama için tamamlayıcı teknikleri takip içerir. Bu hantal, zaman alıcı olabilir ve genellikle ağır virüs bulaşmış doku örneği gerektirir. Kantitatif RT-virüs tespiti (q) PCR kullanımı nicel doğası, yüksek duyarlılık, özgüllük, ölçeklenebilirlik ve hızlı zamanı neden için nedeniyle avantajlıdır. Burada, PCR tüm yöntemi algılama kullanarak bir guanidium thiocyanate-fenol-kloroform çözüm, RNA miktar, bir iki adım PCR tarafından takip tilapia organ parça, toplam ribonükleik asit (RNA) çıkarma üzerinden tarif TiLV için yaklaşımlar tabanlı iletişim kuralı gerektiren, tamamlayıcı Deoksiribonükleik asit (cDNA) sentezi ve TiLV geleneksel PCR ya da qPCR ile SYBR yeşil kullanarak sayısal kimlik tespiti boya. Geleneksel PCR sonrası-PCR adımları gerektirir ve sadece virüs varlığı hakkında bilgi verecek. İkinci yaklaşımı TiLV mutlak miktar az 2 kopya aşağı için izin verir ve böylece alt klinik durumlarda TiLV tanı için son derece yararlı. İki PCR yaklaşımlar, temsilcisi iki laboratuar sonuçlarını ayrıntılı bir açıklamasını ve kapsamlı bir tartışma her iki kritik parametrelerin araştırmacılar ve doktorlarla onların en uygun ve uygulanabilir bulmak sağlamak için dahil edilmiştir TiLV algılama yöntemi.