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Abstract

Bioengineering

蛍光技術の組み合わせを用いた生細胞内力感受性タンパク質ダイナミクスの測定

Published: November 2nd, 2018

DOI:

10.3791/58619

1Department of Biomedical Engineering, Duke University

Abstract

細胞感覚し、機械的刺激をメカノトランスダクションと呼ばれるプロセスで生化学的に検出可能な信号に変換することによって、環境内の物理的な手がかりに対応します。メカノトランスダクションの重要なステップは、外部と内部の環境の間の力の伝達です。強制的に送信する、一連の蛋白質蛋白質の相互作用によって作成された持続的な切れ目のない物理的なリンケージがあります。特定の蛋白質蛋白質の相互作用の機械的負荷いずれかがない場合の相互作用に及ぼす影響、相互作用の高速化解除につながる、あるいは安定の相互作用。どのように分子の負荷についての生きている細胞の蛋白質の転換は順番メカノトランスダクションにおけるその役割の解明蛋白質の力学状態に関する貴重な情報を提供できるが決まります。力感受性タンパク質ダイナミクスを測定するための既存の技術か蛋白質負荷の直接測定を欠いている、携帯電話のコンテキストの外部で実行する測定に依存します。ここでは、生きた細胞内力感受性タンパク質ダイナミクスの測定を可能にする (フレット FRAP) フォトブリーチング法後蛍光共鳴エネルギー伝達蛍光回復のためのプロトコルについて述べる。この手法は、潜在的力感受性タンパク質ダイナミクス細胞レベル下の構造の様々 な異なる種類の細胞の研究を促進する任意のフレット ベース張力センサーに適用されます。

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