Antimicrobica sinergia test di stampante a getto d'inchiostro-assistita Checkerboard automatizzato matrice e il metodo di Time-kill manuale

Come tassi di patogeni di multidrug-resistente (MDR) continuano a salire, superando lo sviluppo di nuovi agenti antimicrobici, nuovi approcci al trattamento di batteri MDR stanno diventando sempre più una necessità. Un tale approccio è la terapia di combinazione, in cui due o più antibiotici sono utilizzati insieme per trattare un'infezione contro cui uno o entrambi i farmaci possono essere inefficaci da solo. Quando i due farmaci, in combinazione, esercitano una maggiore rispetto a effetto additivo, sono considerati sinergici. Ricerca in vitro di attività sinergica è un primo passo importante nel valutare l'eventuale efficacia di combinazioni di farmaci. Due metodi di prova principale sinergia in vitro sono stati sviluppati: la matrice di scacchiera e lo studio di time-kill. In questa carta, presentiamo un metodo di matrice scacchiera automatizzato che fa uso di tecnologia di stampa a getto d'inchiostro per aumentare l'efficienza e la precisione di questa tecnica, come pure un metodo standard manuale sinergia di time-kill. La matrice di scacchiera automatizzato può servire come un test di screening ad alta resa, mentre lo studio di time-kill manuale fornisce dati aggiuntivi, complementari su uccisione e attività sinergica.

La matrice della scacchiera è una modifica di standard concentrazione inibitoria minima (MIC) test, in cui i batteri sono incubati con antibiotici alle combinazioni differenti concentrazioni e valutati per l'inibizione della crescita dopo incubazione overnight. Manuale delle prestazioni della matrice della scacchiera richiede una laboriosa ed error-prone serie di diluizioni e calcoli. Nel metodo automatizzato presentati qui, il calcolo e l'erogazione della soluzione stock antibiotico necessari volumi sono automatizzati attraverso l'uso di tecnologia di stampa a getto d'inchiostro. Nell'analisi della sinergia di time-kill, batteri sono incubati con gli antibiotici di interesse, sia insieme che singolarmente e campionati a intervalli nel corso di 24 h per coltura quantitativa. I risultati possono determinare se una combinazione è sinergica e se è battericida e fornire dati sull'inibizione e uccisione dei batteri nel corso del tempo.