Abstract
Immunology and Infection
Como taxas de patógenos multirresistentes de (MDR) continuam a aumentar, ultrapassando o desenvolvimento de novos antimicrobianos, novas abordagens para o tratamento de bactérias MDR são cada vez mais se tornando uma necessidade. Uma tal abordagem é a terapia de combinação, na quais dois ou mais antibióticos são usados juntos para tratar uma infecção contra qual uma ou ambas as drogas podem ser ineficazes em paz. Quando as duas drogas, em combinação, exercem um maior do que o efeito aditivo, são considerados sinérgicos. Investigações in vitro da atividade sinérgica é um primeiro passo importante em avaliar a possível eficácia das combinações de drogas. Desenvolveram-se dois métodos de teste principal sinergia in vitro: a matriz do tabuleiro de damas e o estudo de tempo... matar. Neste trabalho, apresentamos um método de matriz de quadriculado automatizado que faz uso da tecnologia de impressão jato de tinta para aumentar a eficiência e precisão desta técnica, bem como um método manual padrão tempo matar sinergia. A matriz de quadriculado automatizado pode servir como um ensaio de rastreio com throughput alto, enquanto o estudo de tempo... matar manual fornece dados adicionais, complementares na matança e atividade sinérgica.
A matriz do tabuleiro de damas é uma modificação do padrão concentração inibitória mínima (CIM) ensaios, em que bactérias são incubadas com antibióticos em combinações diferentes de concentração e avaliadas para inibição do crescimento após incubação durante a noite. Desempenho manual da matriz quadriculado requer uma série de cálculos e diluições trabalhosa e propenso a erros. No método automatizado apresentado aqui, o cálculo e distribuição da necessária solução antibiótica volumes são automatizados através do uso de tecnologia de impressão jato de tinta. No ensaio de tempo-matar sinergia, bactérias são incubadas com os antibióticos de interesse, tanto juntos e individualmente e amostradas em intervalos ao longo de 24h para cultura quantitativa. Os resultados podem determinar se uma combinação é sinérgica e seja bactericida e fornecer dados sobre a inibição e matança das bactérias ao longo do tempo.
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