Abstract
Biochemistry
Ekstracellulære vesikler (EVs) kan frigives fra mange forskellige celletyper og detekteres i de fleste, hvis ikke alle, kropsvæsker. EVs kan deltage i celle-til-celle-kommunikation ved at fjer de bioaktive molekyler som RNA eller protein fra en celle til en anden. De fleste undersøgelser af evt er udført i cellekultur modeller eller i evt isoleret fra kropsvæsker. Der er voksende interesse for isolering af EVs fra væv for at studere deres bidrag til fysiologiske processer, og hvordan de er ændret i sygdom. Isolering af evt med tilstrækkeligt udbytte fra væv er teknisk udfordrende på grund af behovet for vævs dissociation uden cellulære skader. Denne metode beskriver en procedure for isolering af evt fra muse levervæv. Metoden indebærer en to-trins proces begyndende med in situ kollagenase fordøjelse efterfulgt af differentiel ultra-centrifugering. Vævs perfusion ved hjælp af kollagenase giver en fordel i forhold til mekanisk skæring eller homogenisering af levervæv på grund af dets øgede udbytte af opnået EVS. Brugen af denne to-trins proces til at isolere EVs fra leveren vil være nyttigt for studiet af væv EVs.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved