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Genetics

人骨髓间充质干细胞细胞外微 rna 的分离、测序和分析

Published: March 8th, 2019

DOI:

10.3791/58655

1The Interdisciplinary Nanoscience Centre, Aarhus University, 2Department of Molecular Biology and Genetics, Aarhus University
* These authors contributed equally

细胞外和循环 rna (exrna) 是由身体的许多细胞类型产生的, 并存在于许多体液中, 如唾液、血浆、血清、牛奶和尿液。这些 rna 的一个子集是转录后的调节剂--微 rna (mirna)。为了描述特定细胞类型产生的 mirna, 体外培养系统可用于从一个细胞子集中提取和分析 exrna。骨髓间充质干细胞的分泌因子与减轻多种疾病有关, 并作为本研究的体外模型系统。本文介绍了小 rna 的采集、纯化和细胞外 mirna 序列库的生成过程。培养基中的 exrna 与细胞 rna 的不同之处在于 rna 样本较低, 这就需要优化程序。该协议为来自培养基的小 exrna 测序提供了全面的指南, 显示了 exrna 纯化和测序过程中每个步骤的质量控制检查点。

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