Lucifer geel-een robuuste Paracellulaire permeabiliteit marker in een Celmodel van de menselijke bloed-hersen barrière

De bloed-hersen barrière BBB bestaat uit endotheliale cellen die een barrière vormen tussen de systemische circulatie en de hersenen om de uitwisseling van niet-essentiële ionen en giftige stoffen te voorkomen. Nauwe kruisingen (TJ) dichten de paracellulaire ruimte in de monolagen effectief, wat resulteert in een intacte barrière. Deze studie beschrijft een LY-gebaseerde fluorescentie test die kan worden gebruikt om de schijnbare permeabiliteit coëfficiënt (P-_app) te bepalen en kan op zijn beurt worden gebruikt om de kinetiek van de vorming van confluente monolagen te bepalen en de resulterende nauwe junctie barrière-integriteit in monolayers van hCMEC/D3. Verder demonstreren we een aanvullend nut van deze assay om de functionele integriteit van TJ in getranssinfecteerde cellen te bepalen. Onze gegevens uit de LY P_app assay toont aan dat de hCMEC/D3-cellen die in een trans well-opstelling zijn gesekt, effectief de grens van de paracellulaire transport 7 dagen-post cultuur beperken. Als aanvullend nut van de gepresenteerde testtonen we ook aan dat de transfectie van de DNA-nanodeeltjes het paracellulaire transport in monolayers van hCMEC/D3 niet verandert.