Производства, очистки и контроля качества для аденоассоциированный вирус основе векторов

Джин средства доставки на основе аденоассоциированный вирусов (AAVs) являются популярным выбором для доставки трансгенов центральной нервной системы (ЦНС), включая приложения генной терапии. Векторы AAV-тиражирование, способных заразить деления и не деления клетки и обеспечить долгосрочные трансген выражение. Важно отметить, что некоторые серотипы, таких как недавно описан PHP. B, может крест крови мозг барьера (ГЭБ) в моделях животных, после системного доставки. Векторы AAV может быть эффективно производится в лаборатории. Однако надежных и воспроизводимых протоколов обязаны получить векторы AAV с достаточной чистоты и титр значения достаточно высоким для приложений в естественных условиях . Этот протокол описывает стратегию эффективной и воспроизводимый для производства вектора AAV, основанный на стратегии градиента очистки iodixanol. Метод очистки iodixanol подходит для получения пакетов векторы AAV высокого титра высокой чистоты, когда по сравнению с другими методами очистки. Кроме того протокол обычно быстрее, чем другие методы, описанные в настоящее время. Кроме того, количественные полимеразы цепная реакция (ПЦР)-стратегия описана для быстрого и точного определения вектор титра, а также Серебряный пятнать метод для определения чистоты пакете вектор. Наконец представитель результаты доставки генов в ЦНС, после системного администрирования AAV-PHP. B, представлены. Такие результаты должны быть возможным в всех лабораториях с использованием протоколов, описанные в этой статье.