Tillämpa avancerade In Vitro odling teknik för att studera mänskliga tarmfloran

Mänskliga tarmfloran spelar en viktig roll i både människors hälsa och sjukdom. Att studera tarmfloran med en in-vivo -modell, är svårt på grund av dess komplexa natur och dess olika association och däggdjur. Målet med detta protokoll är att kultur tarmfloran in vitro som möjliggör studier av gut bakterieflora dynamiken, utan att behöva överväga de däggdjur milieu bidrag. Med in vitro- odling teknik, simuleras de fysiologiska förhållandena av mag tarmkanalen, inklusive parametrar som pH, temperatur, anaerobiosis och transittid. Tarmens yta av tjocktarmen simuleras genom att lägga till mucin-belagd bärare, att skapa en mukös fas, och ytterligare en dimension. Tarmfloran introduceras genom ympning med det mänskliga fekalt materialet. Vid inokulering med detta komplex blandning av bakterier, specifika mikrober är berikad med de olika longitudinella (stigande, tvärgående och fallande kolon) och tvärgående (luminala och slemhinnor) miljöer av in vitro-modellen. Det är avgörande för att systemet att nå steady-state, där gemenskapen och metaboliterna produceras förblir stabila. Experimentella resultat i detta manuskript demonstrera hur gemenskapens inokulerade gut bakterieflora utvecklas till en stabilitetsgemenskap över tid. När steady state uppnås, kan systemet användas att analysera bakteriell interaktioner och gemenskapens funktioner eller för att testa effekterna av tillsatser på tarmfloran, såsom mat, mat komponenter eller läkemedel.