Estudos de probiótico em camundongos neonatais usando Gavage

Modelos do rato adulto foram amplamente utilizados para entender o mecanismo por trás da progressão da doença em seres humanos. A aplicabilidade de estudos realizados em modelos do rato adulto para neonatais é limitada. Para entender melhor a progressão da doença, acolhimento respostas e impacto a longo prazo das intervenções em neonatos, um modelo do rato neonatal provável é um melhor ajuste. O uso esparso de modelos do rato neonatal em parte pode ser atribuído às dificuldades técnicas de trabalhar com esses pequenos animais. Foi desenvolvido um modelo de rato neonatal para determinar os efeitos da administração de probióticos no início da vida e para avaliar especificamente a capacidade de estabelecer a colonização no tracto intestinal de rato recém-nascido. Especificamente, para avaliar a colonização de probiótico no mouse neonatal, Lactobacillus plantarum (LP) foi entregue diretamente no trato gastrointestinal neonatal do mouse. Para este fim, LP foi administrado a ratos alimentando através de intraesofágico gavagem (IE). Foi desenvolvido um método altamente reprodutível para padronizar o processo de gavage IE que permite uma administração precisa de probiótico dosagens, minimizando o trauma, um aspecto particularmente importante dado a fragilidade dos ratos recém-nascidos. As limitações deste processo incluem possibilidades de irritação esofágica ou danos e aspiração se gavaged incorretamente. Esta abordagem representa uma melhoria nas práticas actuais porque gavage de IE para o esôfago distal reduz as chances de aspiração. Após a intubação, o perfil de colonização do probiótico foi rastreado usando a reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) do DNA extraído intestinal com primers específicos de LP. Ninhada de diferentes configurações e técnicas de gestão de gaiola foram utilizadas para avaliar o potencial de propagação da colonização. O protocolo detalha os meandros da gavagem de rato neonatal do IE e quantificação de colonização subsequente com LP.