En positioneringsenhet för placering av möss under intranasal siRNA leverans till centralanervsystemet

Intranasal (IN) Drug leverans till hjärnan har vuxit fram som en lovande metod för att kringgå blod-hjärnbarriären (BBB) för leverans av läkemedel i centralanervsystemet (CNS). Nyligen genomförda studier visar användningen av en peptid, RVG9R, införliva den minimala receptor-bindande domänen av rabies viruset glykoprotein, i framkalla leverans av siRNA till nervceller i hjärnan. I detta protokoll, peptid-siRNA formuleringen levereras intranasalt med en pipett i den dominerande handen, medan den sövda musen hindras av kragen med dominanta hand i en "Head ner-och-framåt position" för att undvika dränering i lungorna och mage vid inandning. Denna exakta gripande av möss kan läras men är inte lätt och kräver övning och skicklighet för att resultera i effektiv CNS upptag. Vidare, processen är långdragen, kräver ca 45 min för administrering av en total volym av ~ 20-30 μL lösning i 1-2 μL dropp volymer per inandning, med 3-4 min viloperioder mellan varje inhalation. Syftet med denna studie är att avslöja en mus positionering enhet som möjliggör lämplig placering av möss för effektiv administration av peptid-siRNA formulering. Flera funktioner är införlivade i utformningen av enheten, såsom fyra eller åtta positionsstolar med justerbar höjd och lutning för att hindra sövda möss i huvudet ner-och-framåt position, vilket möjliggör enkel visualisering av mössen s Nares och en inbyggd värmedyna för att bibehålla mössen kroppstemperatur under förfarandet. Viktigt, förmågan att behandla fyra eller åtta möss samtidigt med RVG9R-siRNA komplex på detta sätt möjliggör studier på en mycket snabbare tidsskala, för testning av en i terapeutisk siRNA tillvägagångssätt. Sammanfattningsvis, denna enhet möjliggör lämplig och kontrollerad mus huvud positionering för tillämpning av RVG9R-siRNA och andra terapeutiska molekyler, såsom nanopartiklar eller antikroppar, för CNS leverans.