Studie over het metabolisme van zes systemische insecticiden in een nieuw opgerichte cel schorsing cultuur afgeleid van thee (Camellia sinensis L.) Bladeren

Een platform voor het bestuderen van insecticide metabolisme met behulp van in vitro weefsels van theeplant werd ontwikkeld. De bladeren van steriele thee plantjes werden veroorzaakt om losse aanroepus op Murashige en Skoog (Mej.) basismedia met de installatie hormonen te vormen 2, 4-dichlorophenoxyacetic zuur (2, 4-D, 1,0 mg L^-1) en KINETIN (KT, 0,1 mg l^-1). Aanroepus vormde zich na 3 of 4 rondes van subculturing, elk die 28 dagen duurt. Losse Callus (ongeveer 3 g) werd vervolgens geënt in B5 vloeibare media met dezelfde plantenhormonen en werd gekweekt in een schudden incubator (120 rpm) in het donker bij 25 ± 1 ° c. Na 3 − 4 subculturen, een cel schorsing afgeleid van thee blad werd vastgesteld op een subcultuur ratio variërend tussen 1:1 en 1:2 (schorsing moeder vloeistof: vers medium). Met behulp van dit platform, zes insecticiden (5 µ g mL^-1 elk thiamethoxam, Imidacloprid, Acetamiprid, imidaclothiz, dimethoaat, en omethoaat,) werden toegevoegd in de thee Leaf-afgeleide cel schorsing cultuur. Het metabolisme van de insecticiden werd gevolgd gebruikend vloeibare chromatografie en de chromatografie van het gas. Om het nut van de Tea Cell Suspension cultuur te valideren, werden de metabolieten van thiamethoxan en dimethoaat aanwezig in behandelde cellen culturen en intacte planten vergeleken met massaspectrometrie. In behandelde Tea Cell culturen, zeven metabolieten van thiamethoxan en twee metabolieten van dimethoaat werden gevonden, terwijl in behandelde intacte planten, slechts twee metabolieten van thiamethoxam en een van dimethoaat werden gevonden. Het gebruik van een cel schorsing vereenvoudigde de metabole analyse in vergelijking met het gebruik van intacte thee planten, vooral voor een moeilijke matrix zoals thee.