क्रायोसेक्शन्ड ज़ेब्राफ़िश भ्रूण पर अनुक्रमिक इम्यूनोफ्लोरेसेंस और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री

intercellular बातचीत की जांच अक्सर विशिष्ट सेल आबादी और सटीक प्रोटीन स्थानीयकरण के असतत लेबलिंग की आवश्यकता है. जेब्राफ़िश भ्रूण एक में विवो मॉडल के साथ इस तरह की बातचीत की जांच के लिए एक उत्कृष्ट उपकरण है। प्रोटीन अभिव्यक्ति का आकलन करने के लिए पूरे-माउंट इम्यूनोहिस्टोकेमिकल और इम्यूनोफ्लोरेसेंस परख अक्सर जेब्राफ़िश भ्रूण में लागू किए जाते हैं। हालांकि, तीन आयामी अंतरिक्ष में सह-स्थानीयकृत प्रोटीन की सटीक मानचित्रण प्राप्त करना मुश्किल हो सकता है। इसके अलावा, कुछ अध्ययनों में दो एंटीबॉडी के उपयोग की आवश्यकता हो सकती है जो एक ही तकनीक के साथ संगत नहीं हैं (उदाहरण के लिए, एंटीबॉडी 1 इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के लिए ही उपयुक्त है और एंटीबॉडी 2 इम्यूनोफ्लोरेसेंस के लिए ही उपयुक्त है)। यहाँ वर्णित विधि का उद्देश्य प्रारंभिक चरण जेब्राफ़िश भ्रूण से व्युत्पन्न व्यक्तिगत क्रायोसेक्शन पर अनुक्रमिक इम्यूनोफ्लोरेसेंस और/या इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री करना है। यहाँ हम एक एकल सेल स्तर पर प्रोटीन अभिव्यक्ति की सटीक पहचान प्राप्त करने के क्रम में एक ही क्रायोसेक्शन के लिए इमेजिंग इम्यूनोफ्लोरेसी, इमेजिंग, इम्यूनोफ्लोरेसीकेमिया के अनुक्रमिक दौर के उपयोग का वर्णन करते हैं। इस पद्धति के प्रारंभिक चरण ज़ेब्राफ़िश भ्रूण है कि व्यक्तिगत कोशिकाओं में कई प्रोटीन लक्ष्यों की सही पहचान की आवश्यकता में किसी भी अध्ययन के लिए उपयुक्त है.