Monocouches de Colonoid humain pour étudier les Interactions entre les pathogènes, germes commensaux et hôte épithélium Intestinal

3 dimensions (3D) enteroid ou colonoid les cultures humaines dérivées de cellules souches base de crypte sont actuellement le modèle plus avancé ex vivo de l’épithélium intestinal. En raison de leurs structures fermées et prise en charge de la matrice extracellulaire importante, cultures 3D ne sont pas idéales pour les études de l’hôte-pathogène. Enteroids ou colonoids peut être cultivé comme monocouches épithéliales sur des membranes de culture de tissu perméable pour permettre la manipulation des deux Luminale et surfaces cellulaires basolatérale et fluides qui l’accompagne. Cette accessibilité accrue de surface Luminale facilite la modélisation des interactions épithéliales bactérie-hôte telles que la capacité de dégrader de mucus d’entérohémorragique Escherichia coli (EHEC) sur l’épithélium colique. Une méthode pour la fragmentation de la culture 3D, monocouche ensemencement et transépithélial des mesures de résistance électrique (TER) pour surveiller la progression vers la confluence et la différenciation sont décrites. Différenciation de monocouche Colonoid rendements mucus sécrété qui peuvent être étudiés par les techniques d’immunofluorescence ou immunoblotting. Plus généralement, monocouches enteroid ou colonoid permettent une plate-forme physiologiquement pertinents évaluer les populations de cellules spécifiques peuvent être ciblées par des micro-organismes pathogènes ou commensales.