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Genetics

Inducible, सेल प्रकार- Arabidopsis में विशेष अभिव्यक्ति lhgr के माध्यम से thaliana-मध्यस्थता ट्रांस-सक्रियण

Published: April 19th, 2019

DOI:

10.3791/59394

1Department of Developmental Physiology, Centre for Organismal Studies (COS) Heidelberg, 2Department of Cell Biology, Centre for Organismal Studies (COS) Heidelberg, 3Department of Stem Cell Biology, Centre for Organismal Studies (COS) Heidelberg
* These authors contributed equally

Abstract

Inducible, ऊतक विशिष्ट अभिव्यक्ति एक महत्वपूर्ण और शक्तिशाली करने के लिए आनुवंशिक क्षोभ के spatio-लौकिक गतिशीलता का अध्ययन उपकरण है । सिद्ध और बेंचमार्क LhGR प्रणाली के साथ लचीला और कुशल GreenGate क्लोनिंग प्रणाली का मेल (यहां जीआर-LhG4) inducible अभिव्यक्ति के लिए कहा, हम ट्रांसजेनिक Arabidopsis लाइनों का एक सेट है कि एक effector की अभिव्यक्ति ड्राइव कर सकते है उत्पंन किया है तीन मुख्य संयंत्र meristems में विशिष्ट कोशिका प्रकार की एक श्रृंखला में कैसेट । यह अंत करने के लिए, हम पहले से विकसित जीआर-LhG4 प्रणाली एक chimeric ट्रांसक्रिप्शन फैक्टर और एक सजात पॉप प्रकार अभिव्यक्ति के स्तर की एक विस्तृत श्रृंखला पर तंग नियंत्रण सुनिश्चित करने के प्रमोटर के आधार पर चुना । इसके अलावा, जहां सिंथेटिक ट्रांसक्रिप्शन फैक्टर सक्रिय है अभिव्यक्ति डोमेन विज़ुअलाइज़ करने के लिए, एक एर-स्थानीयकृत mTurquoise2 फ्लोरोसेंट रिपोर्टर नियंत्रण में pOp4 या pOp6 प्रमोटर ड्राइवर लाइनों में एंकोडेड है । यहाँ, हम एक ड्राइवर या effector लाइन उत्पन्न करने के लिए आवश्यक कदम का वर्णन और कैसे सेल प्रकार विशिष्ट अभिव्यक्ति प्रेरित किया जा सकता है और गोली मार शीर्षस्थ विभज्योतक, रूट शीर्षस्थ विभज्योतक और arabidopsisके केंबियम में पालन करने के लिए प्रदर्शन. कई या सभी ड्राइवर लाइनों का उपयोग करके, एक या कई कारकों (effectors) सिंथेटिक पॉप प्रमोटर के नियंत्रण में व्यक्त करने के संदर्भ विशिष्ट प्रभाव तेजी से मूल्यांकन किया जा सकता, उदाहरण के लिए एक पार के F1 पौधों में एक effectors और कई के बीच ड्राइवर रेखाएं । इस दृष्टिकोण VND7 की अस्थानिक अभिव्यक्ति, एक एनएसी प्रतिलेखन कारक एक सेल स्वायत्त तरीके से अस्थानिक माध्यमिक सेल दीवार बयान उत्प्रेरण में सक्षम द्वारा उदाहरण है ।

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