Verwerking van bronchoalveolaire lavage vloeistof en geëvenaard bloed voor alveolaar macrofaag en CD4⁺ T-cel Immunophenotypering en HIV-reservoir beoordeling

Bronchoscopie is een medische procedure waarbij normale zoutoplossing wordt geïnjecteerd in de longen via een bronchoscoop en vervolgens zuigkracht wordt toegepast, verwijderen van bronchoalveolaire spoeling (bal) vloeistof. De BAL vloeistof is rijk aan cellen en kan dus een ' snapshot ' van het pulmonale immuunmilieu bieden. CD4 T-cellen zijn de best gekarakteriseerde HIV-reservoirs, terwijl er sterk bewijs is dat weefsel macrofagen, waaronder alveolaire macrofagen (AMs), ook dienen als virale reservoirs. Er is echter nog veel onbekend over de rol van AMs in de context van de oprichting en het onderhoud van het HIV-reservoir. Daarom is het ontwikkelen van een protocol voor de verwerking van BAL vloeistof om cellen te verkrijgen die kunnen worden gebruikt in virologische en immunologische testen om de celpopulaties en deelverzamelingen binnen de longen te karakteriseren en te evalueren relevant voor het begrijpen van de rol van de longen als HIV Reservoirs. Hierin beschrijven we een dergelijk protocol, met standaardtechnieken zoals eenvoudige centrifugeren en Flowcytometrie. De CD4 T-cellen en AMs kunnen vervolgens worden gebruikt voor volgende toepassingen, waaronder immunophenotypering en HIV-DNA en RNA-kwantificering.