Обработка бронхоальвеолярной жидкости и совмещенных крови для альвеолярного макрофага и CD4^- Т-клеточного иммунофенотипирования и оценки водохранилища ВИЧ

Бронхоскопия является медицинской процедурой, в которой нормальный сосуд вводится в легкие через бронхоскоп, а затем всасывание применяется, удаление бронхоальвеолярной лавыни (BAL) жидкости. BAL жидкости богата клетками и, таким образом, может обеспечить "снимок" легочной иммунной среды. CD4 Т-клетки являются наиболее характеризуемыми резервуарами ВИЧ, в то время как есть веские доказательства того, что макрофаги тканей, в том числе альвеолярные макрофаги (AMs), также служат в качестве вирусных резервуаров. Тем не менее, многое еще неизвестно о роли AMs в контексте создания и поддержания резервуаров ВИЧ. Таким образом, разработка протокола для обработки жидкости BAL для получения клеток, которые могут быть использованы в вирусологических и иммунологических анализов для характеристики и оценки популяций клеток и подмножеств в легких имеет отношение к пониманию роли легких, как ВИЧ Водохранилищ. Здесь мы описываем такой протокол, используя стандартные методы, такие как простая центрифугация и цитометрия потока. CD4 Т-клеток и AMs могут быть использованы для последующего применения, в том числе иммунофенотипирования и ВИЧ ДНК и РНК количественной оценки.