Procesamiento de líquido de lavado broncoalveolar y sangre emparejada para macrófago alveolar y CD4⁺ inmunofenotipado de células T y evaluación del embalse de VIH

La broncoscopia es un procedimiento médico por el cual se inyecta salina normal en los pulmones a través de un broncoscopio y luego se aplica la succión, eliminando el líquido de lavado broncoalveolar (BAL). El líquido BAL es rico en células y, por lo tanto, puede proporcionar una "instantánea" del entorno inmunológico pulmonar. Los cd4 t son los reservorios de VIH mejor caracterizados, mientras que hay pruebas sólidas que sugieren que los macrófagos tisulares, incluidos los macrófagos alveolares (AM), también sirven como reservorios virales. Sin embargo, todavía se desconoce mucho sobre el papel de los hombres de aMe en el contexto del establecimiento y el mantenimiento de los embalses de VIH. Por lo tanto, el desarrollo de un protocolo para procesar el líquido BAL para obtener células que pueden ser utilizadas en ensayos virológicos e inmunológicos para caracterizar y evaluar las poblaciones celulares y subconjuntos dentro del pulmón es relevante para entender el papel de los pulmones como VIH Embalses. Aquí, describimos este protocolo, empleando técnicas estándar como la centrifugación simple y la citometría de flujo. Las células T CD4 y los AM pueden utilizarse para aplicaciones posteriores, incluidos el inmunofenotipado y la cuantificación del ADN y ARN del VIH.