Behandling av bronkoalveolär lavage vätska och matchade blod för alveolära Makrofage och CD4⁺ T-cell Immunophenotyping och hiv Reservoir Assessment

Bronkoskopi är ett medicinskt ingrepp där normal saltlösning injiceras i lungorna via ett bronkoskop och sedan sug appliceras, ta bort bronkoalveolär pumpning (bal) vätska. BAL vätskan är rik på celler och kan därmed ge en "ögonblicksbild" av lung immun miljön. CD4 T-celler är de bästa kännetecknas HIV-reservoarer, medan det finns starka belägg som tyder på att vävnad makrofager, inklusive alveolära makrofager (AMs), också fungera som virala reservoarer. Mycket är dock fortfarande okänt om AMs roll i samband med etablering och underhåll av HIV-reservoaren. Därför, utveckla ett protokoll för bearbetning av BAL vätska för att få celler som kan användas i virologiska och immunologiska analyser för att karakterisera och utvärdera cellpopulationer och undergrupper inom lungan är relevant för att förstå rollen av lungorna som HIV Reservoarer. Häri beskriver vi ett sådant protokoll och använder standardtekniker som enkel centrifugering och flödescytometri. CD4 T-celler och AMS kan sedan användas för efterföljande tillämpningar, inklusive immunfenotypning och hiv-DNA och RNA-kvantifiering.