Excitation-scanning Hyperspectral Imaging mikroskopi til effektivt at diskriminere fluorescens signaler

Flere teknikker er afhængige af påvisning af fluorescens signaler for at identificere eller studere fænomener eller for at belyse funktioner. Adskillelse af disse fluorescens signaler blev vist besværligt indtil fremkomsten af hyperspectral Imaging, hvor fluorescens kilder kan adskilles fra hinanden såvel som fra baggrunds signaler og autofluorescens (givet kendskab til deres spektral underskrifter). Men traditionelle, emission-scanning hyperspectral Imaging lider af langsomme anskaffelses tider og lav signal-til-støj nøgletal på grund af den nødvendige filtrering af både excitation og emission lys. Det har tidligere vist sig, at excitation-scanning hyperspectral Imaging reducerer den nødvendige erhvervelse tid samtidig øge signal-til-støj forholdet af erhvervede data. Ved hjælp af kommercielt tilgængeligt udstyr, beskriver denne protokol, hvordan man samler, kalibrerer og bruger et excitation-scanning hyperspectral Imaging mikroskopi system til adskillelse af signaler fra flere fluorescens kilder i en enkelt prøve. Selv om denne teknik er meget anvendelig på mikroskopisk billeddannelse af celler og væv, kan den også være nyttig for enhver form for eksperiment, der udnytter fluorescens, hvor det er muligt at variere excitation bølgelængder, herunder, men ikke begrænset til: kemisk billeddannelse, miljø anvendelser, øjenpleje, levnedsmiddelvidenskab, retsvidenskab, lægevidenskab og mineralogi.