인간 유도 만능 줄기 세포 유래 장 소기관을 사용 하 여 살 모 넬 라 및 기타 병원 균에 대 한 상피 세포 보호 연구 및 수정

상기 장 오 르가 노이 드 (이 호) 시스템은 인간 직감의 상피 내벽을 대표 하는 3 차원 구조물이 인간 유도 만능 줄기 세포 (힙 스) 로부터 생산 될 수 있고 배양에 유지 되며, 촉진 하는 흥미로운 기회를 제공 한다 장 용 성 감염에 대 한 상피 반응의 모델링. 생체 내에서 장 상피 세포 (IECs)는 장내 항상성 조절에 핵심적인 역할을 하며,이를 통해 발생 하는 메커니즘이 완전히 해명 되지 않더라도 병원 균을 직접적으로 억제할 수 있습니다. 상기 사이토카인 인터 루 킨)는 감염에 반응 하 여 항균 펩 티 드 및 케 모카 인의 방출을 유도 하는 것을 포함 하는, 창 자 상피 장벽의 유지 및 방어에 역할을 하는 것으로 나타났다.

우리는 지 하 막 기질 기지를 둔 장 문화 시스템에 그들을 포함 하기 전에 그들의 배양 매체에 특정 사이토카인 조합을 추가 하 여 iHOs로 건강 한 통제 힙 스 트의 분화를 기술 합니다. 일단 삽입 되 면 iHOs는 Noggin, CHIR99021, 표 피 성장 인자 EGF, 프로 스타 글란 딘 E2 및 Y-27632 디 히드로 클로 라 이드로 보충 된 매체에서 재배 됩니다. 이 호 초고 구조의 수동 중단에의 한 주간 구절은 일부는 크립 트/융 모 구조를 전시와 함께, budded iHOs의 형성에 이르게. 모든 iHOs는 각 세포의 서브셋, 투과 전자 현미경의 특정 마커에 대 한 면역 염색을 통해 확인 될 수 있는 잔 세포, 장 내 분 비 세포, 판 셀 및 편광 세포로 구성 된 분화 된 상피를 입증 (TEM) 및 정량적 PCR (qPCR)을 제공 한다. 감염을 모형 화 하기 위하여, 살 모 넬 라의 Enterica Serovar TYPHIMURIUM SL1344는 ihos의 루멘에 마이크로 주입 되 고 37 ° c에서 90 분 동안 인큐베이션 되며, 변성 겐 타 마이 신 보호 분석 법은 세포내의 수준을 확인 하기 위해 수행 세균 침공. 일부 iHOs는 또한 감염 되기 전에 재조합 인간 IL-22 (rhIL-22)로 전처리 되어이 사이토카인이 살 모 넬 라 감염 으로부터 보호 되는지를 확립 한다.