Kombinera icke-reducerande SDS-PAGE analys och kemisk crosslinking att upptäcka Multimeric komplex stabiliserats med disulfid kopplingar i däggdjurs celler i kultur

Strukturerna hos många proteiner stabiliseras genom kovalenta disulfidkopplingar. I det senaste arbetet har denna obligation också klassificerats som en post-translationell modifiering. Därför är det viktigt att kunna studera denna modifiering i levande celler. En enkel metod för att analysera dessa Cystein-stabiliserad multimeric komplex är genom en två-stegs metod för icke-reducerande SDS-PAGE analys och formaldehyd tvär bindning. Denna två stegs metoden är fördelaktigt som det första steget för att avslöja multimeric komplex stabiliserats av disulfid kopplingar på grund av dess tekniska lätthet och låg drifts kostnad. Här, det mänskliga benet osteosarkom cellinjen U-2 OS används för att illustrera denna metod genom att specifikt analysera den nukleära isoformen av dUTPase.