通过将表达的腺病毒注射到小鼠乳腺腺中,模拟乳腺癌

乳腺癌是一种异质疾病,可能是由于不同来源细胞和致癌事件之间的复杂相互作用。鼠标模型有助于深入了解这些复杂过程。虽然已经开发了许多小鼠模型来研究各种致癌事件和原源细胞对乳腺肿瘤发生的贡献,但这些模型往往不是细胞型或器官特异性的,或者不能诱导乳腺肿瘤的启动。时间控制的方式。在这里,我们描述了一个协议,以生成一种新型的乳腺癌小鼠模型,基于在电感中注射Cre-表达腺病毒(Ad-Cre)到小鼠乳腺(Mg)。由于直接将 Ad-Cre 注射到乳腺导管中,这种方法是 MG 特异性,在其他器官中没有任何不需要的癌症诱导。内导注射程序可以在小鼠MG发育的不同阶段进行(因此,它允许从3-4周起对癌症诱导进行时间控制)。细胞类型特异性可以通过使用不同的细胞类型特异性启动子来驱动腺病毒载体中的Cre表达。我们表明,在角蛋白8或角蛋白5促进剂的控制下,通过Ad-Cre的内导注射,可以紧紧围绕基于Cre/loxP的基因操作的发光和基底乳腺上皮细胞(MECs)。通过合并有条件的Cre报告器(例如,Cre/loxP诱导的Rosa26-YFP报告),我们表明Ad-Cre所针对的MECs和从它们中提取的肿瘤细胞,可以通过在电内注射后跟踪报告者阳性细胞来追踪。