Modelagem de câncer de mama através de uma injeção intraductal de CRE-expressando Adenovirus na glândula mamária do mouse

O câncer de mama é uma doença heterogênea, possivelmente devido a interações complexas entre diferentes células de origem e eventos oncogênicos. Os modelos de mouse são fundamentais para obter insights sobre esses processos complexos. Embora muitos modelos do rato sejam desenvolvidos para estudar contribuições de vários eventos e pilhas oncogênico da origem à tumorigenese do peito, estes modelos são frequentemente não Cell-Type ou órgão específico ou não podem induzir o início do tumorigênese mamária em um forma temporalmente controlada. Aqui nós descrevemos um protocolo para gerar um novo tipo de modelos do rato do cancro da mama baseados na injeção intraductal do adenovírus CRE-expressando (AD-CRE) em glândulas mamária do rato (MGS). Devido à injeção direta de AD-CRE em dutos mamários, esta abordagem é específica de MG, sem qualquer indução de câncer indesejada em outros órgãos. O procedimento intraductal da injeção pode ser executado nos ratos em estágios diferentes de seu desenvolvimento do magnésio (assim, permite o controle temporal da indução do cancro, partindo de ~ 3-4 semanas da idade). A especificidade do tipo celular pode ser alcançada usando diferentes promotores específicos do tipo célula para impulsionar a expressão de CRE no vetor adenoviral. Nós mostramos que as pilhas epithelial mamária Luminal e basais (MECS) podem fortemente ser alvejadas para a manipulação genética CRE/loxp-baseada através de uma injeção intraductal de AD-CRE o controle do promotor da queratina 8 ou da queratina 5, respectivamente. Incorporando um repórter condicional de CRE (por exemplo, repórter de CRE/loxP-inducible Rosa26-YFP ), nós mostramos que os MECS alvejados por AD-CRE, e as pilhas do tumor derivou deles, podem ser traçados seguindo as pilhas repórter-positivas após a injeção intraductal.