रोगी व्युत्पन्न विषम लैंगिक Xenograft मॉडल अग्नाशय के कैंसर के तुलनात्मक दवा आकलन के लिए मेजबान के रूप में ज़ेब्राफ़िश लार्वा का उपयोग

रोगी व्युत्पन्न ट्यूमर xenograft (PDX) और सेल व्युत्पन्न ट्यूमर xenograft (CDX) पूर्व नैदानिक आकलन, दवा मार्गदर्शन और बुनियादी कैंसर शोध के लिए महत्वपूर्ण तकनीक हैं. पारंपरिक मेजबान चूहों में PDX मॉडल की पीढ़ियों समय लेने वाली हैं और केवल नमूनों का एक छोटा सा अनुपात के लिए काम कर रहे. हाल ही में, ज़ेब्राफ़िश PDX (zPDX) एक अद्वितीय मेजबान प्रणाली के रूप में उभरा है, छोटे पैमाने पर और उच्च दक्षता की विशेषताओं के साथ. यहाँ, हम zPDX मॉडल में तुलनात्मक रसायन चिकित्सा आकलन के लिए एक दोहरी फ्लोरोसेंट लेबल ट्यूमर xenograft मॉडल पैदा करने के लिए एक अनुकूलित पद्धति का वर्णन. ट्यूमर कोशिकाओं और फाइब्रोब्लास्ट्स विभिन्न संस्कृति की स्थिति में ताजा फसल या जमे हुए अग्नाशय के कैंसर के ऊतकों से समृद्ध थे। दोनों कोशिका समूहों को lentivirus द्वारा हरे या लाल फ्लोरोसेंट प्रोटीन व्यक्त करने के साथ-साथ एक एंटी-एपोप्टोसिस जीन BCL2L1द्वारा लेबल किया गया था। ट्रांसफेक्टेड कोशिकाओं को पहले से मिश्रित किया गया था और 2 डीपीएफ लार्वा जेब्राफ़िश में सह-इंजेक्शन किया गया था जिसे तब संशोधित ई 3 माध्यम में 32 डिग्री सेल्सियस में पैदा किया गया था। xenograft मॉडल रसायन चिकित्सा दवाओं और / या BCL2L1 अवरोध करनेवाला द्वारा इलाज किया गया, और दोनों ट्यूमर कोशिकाओं और फाइब्रोब्लास्ट्स की viabilities एक साथ जांच की गई. सारांश में, इस प्रोटोकॉल शोधकर्ताओं को जल्दी से एक विषम ट्यूमर microenvironment के साथ zPDX मॉडल की एक बड़ी राशि उत्पन्न करने के लिए अनुमति देता है और एक लंबे समय तक अवलोकन खिड़की और दवा उम्मीदवारों की दक्षता का आकलन करने में एक और अधिक सटीक परिमाण प्रदान करता है.