الخياطة في فيفو الاختبارات الخلوية لدراسة المناعي في الأورام الخاصة^{CD8 +} T الاستجابات الخلية

كاربوكسيفلوريسسين الناجحة استر (cfse)-مقرها في اختبارات الخلايا الحيوية تمكين الحساسية ودقه الكمية من^{CD8 +} لحل T اللمفاويات (CTL) الاستجابات التي اثارتها ضد الببتيدات المشتقة من الورم والممرض. هم يقدمون عده فوائد علي تقليديه قتل اختبارات. أولا ، انها تسمح برصد السمية الخلوية بوساطة CTL داخل الاجهزه اللمفاوية الثانوية سليمه معماريا ، وعاده في الطحال. ثانيا ، انها تسمح للدراسات الميكانيكية خلال المراحل فتيله ، المستجيب والاستدعاء من الاستجابات CTL. ثالثا ، انها توفر منصات مفيده لاختبار فعاليه اللقاح/المخدرات في بيئة الجسم الخارجي حقا. هنا ، ونحن نقدم بروتوكول الأمثل لفحص الاستجابات CTL المصاحبة ضد أكثر من واحد من مرضبه الببتيد من نموذج مستضد الورم (Ag) ، وهي الفيروس simian 40 (SV40)-ترميز كبير T Ag (T Ag). مثل معظم البروتينات السرطانية ذات الصلة سريريا, T Ag الموانئ العديد من الببتيدات المناعية المحتملة. ومع ذلك ، فقط أربعه الببتيدات هذه للحث علي الاستجابات CTL للكشف في C57BL/6 الفئران. يتم ترتيب هذه الاستجابات باستمرار في ترتيب هرمي استنادا إلى حجمها ، والذي يشكل الأساس ل T_CD8 "المناعية" في هذا النظام القوي. ووفقا لذلك ، يتركز الجزء الأكبر من الاستجابة t_CD8 الخاصة t Ag ضد واحده السمية المناعية في حين يتم التعرف علي الثلاثة الأخرى المربه والرد علي ضعيف فقط. المناعي يهدد اتساع الاستجابات المضادة للورم T_CD8 وهو ، علي هذا النحو ، يعتبره الكثيرون عائقا امام نجاح التطعيم ضد السرطان. ولذلك ، فمن المهم ان نفهم العوامل الخلوية والجزيئية واليات التي تملي أو تشكل T_CD8 امودومنيانسي. البروتوكول الذي وصفناه هنا مصمم خصيصا لتحقيق هذه الظاهرة في نموذج التمنيع T Ag ، ولكن يمكن تعديله بسهوله وتوسيعه ليشمل دراسات مماثله في نماذج الأورام الأخرى. ونحن نقدم أمثله عن كيفيه قياس تاثير التدخلات العلاجية المناعية التجريبية باستخدام في اختبارات الخلوية الحيوية.