Utarbeidelse av nøytralt-ladet, pH-responsive polymer nanopartikler for cytosolic siRNA levering

Suksessen til siRNA som en målrettet molekylær medisin er avhengig av sin effektive cytosolic levering til celler i vevet i patologi. Klinisk suksess for behandling av tidligere ' undruggable ' lever sykdoms mål med siRNA har blitt oppnådd. Men effektiv tumor siRNA levering nødvendiggjør ytterligere farmakokinetiske design hensyn, inkludert lang sirkulasjon tid, Evasion av klaring organer (f. eks, lever og nyrer), og tumor penetrasjon og oppbevaring. Her beskriver vi utarbeidelse og in vitro fysikalsk/biologisk karakterisering av polymer nanopartikler designet for effektiv siRNA levering, spesielt til ikke-hepatic vev som svulster. Den siRNA nanopartikler er utarbeidet av elektrostatisk kompleks av siRNA og diblokk kopolymer Poly (etylen glykol-b-[2-(dimetylamino) etanol akrylat-co-butyl AKRYLAT]) (PEG-DB) for å danne polyion komplekser ( polyplexes) der siRNA er sequestered innenfor polyplex kjernen og PEG danner en hydrofile, nøytralt-ladet Corona. Videre DB blokken blir membran-lytisk som blemmer av endolysosomal veien acidify (< pH 6,8), utløser endosomal rømme og cytosolic levering av siRNA. Metoder for å karakterisere de fysikalsk egenskapene til siRNA nanopartikler som størrelse, overflate ladning, partikkel morfologi og siRNA-lasting er beskrevet. Bioactivity av siRNA nanopartikler måles ved hjelp av luciferase som en modell gen i en rask og høy gjennomstrømming gen demping analysen. Tegninger hvilke admission card disse Initial prøver (som PEG-DB-basert polyplexes) er betraktet som passende for oversettelse å prekliniske dyr studier vurderingen leveringen av siRNA å svulst eller annet steder av patologi.