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Medicine

Isolement et purification des périphytes cardiaques murines

Published: August 16th, 2019

DOI:

10.3791/59571

1Department of Cardiometabolic Disorders, Amgen Research and Discovery, Amgen Inc., 2Department of Translational Sciences, Amgen Research and Discovery, Amgen Inc.

Abstract

Les péricarténties, cellules périvasculaires des microvaisseaux et des capillaires, sont connues pour jouer un rôle dans l'angiogenèse, la stabilisation des navires et l'intégrité de la barrière endothéliale. Cependant, leurs fonctions spécifiques aux tissus dans le cœur ne sont pas bien comprises. De plus, il n'existe actuellement aucun protocole utilisant des matériaux facilement accessibles pour isoler et purifier les péririytes d'origine cardiaque. Notre protocole se concentre sur l'utilisation du modèle très utilisé des mammifères, la souris, comme source de cellules. En utilisant la digestion enzymatique et la dissociation mécanique du tissu cardiaque, nous avons obtenu un mélange brut de cellules qui a été encore purifié par le tri de cellules activant de fluorescence (FACS) par une pléthore de marqueurs. Parce qu'il n'y a pas de marqueur sans équivoque unique pour les péricartés, nous avons fermé pour les cellules qui étaient CD31-CD34-CD45-CD140b-NG2-CD146. Après la purification, ces cellules primaires ont été cultivées et passages plusieurs fois sans aucun changement dans la morphologie et l'expression de marqueur. Avec la capacité d'obtenir régulièrement des péritéytes cardiaques maurines primaires utilisant notre protocole, nous espérons mieux comprendre le rôle des péritéytes dans la physiologie cardiovasculaire et leur potentiel thérapeutique.

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