A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Immunology and Infection
Atomkraften mikroskopi baseret enkelt celle Force spektroskopi (AFM-SCFS) er et kraftfuldt værktøj til at studere biofysiske egenskaber af levende celler. Denne teknik giver mulighed for sondering interaktion styrker og dynamik på en levende celle membran, herunder dem mellem celler, receptor og ligands, og sammen med mange andre variationer. Det fungerer også som en mekanisme til at levere en fysisk eller biokemisk stimulus på enkeltceller i en spatialt kontrolleret måde, således at specifikke celle aktivering og efterfølgende cellulære hændelser, der skal overvåges i realtid, når det kombineres med levende celle Fluorescens Imaging. Det vigtigste skridt i disse AFM-SCFS målinger er AFM-cantilever funktionalisering, eller med andre ord, vedhæfte et emne af interesse for cantilever. Her præsenterer vi metoder til at ændre AFM cantihåndtag med en enkelt T-celle og en enkelt polystyren perle henholdsvis for immunologiske undersøgelser. Førstnævnte involverer en biokompatibel lim, der par enkelt T-celler til spidsen af en flad cantilever i en opløsning, mens sidstnævnte er afhængig af en epoxy lim til enkelt perle vedhæftning i luftmiljøet. Der gives også to immunologiske anvendelser i forbindelse med hver cantilever modifikation. De metoder, der beskrives her, kan let tilpasses forskellige celletyper og faste partikler.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved