다각형 광 산란에 결합된 크기 배제 크로마토그래피에 의한 단백질의 특성 (SEC-MALS)

용액에서 단백질및 단백질 단백질 복합체의 분자량을 결정하는 데 일반적으로 사용되는 분석 크기 배제 크로마토그래피(SEC)는 분석물의 용출 량에 의존하여 분자를 추정하는 상대적인 기술입니다. 무게. 단백질이 구형이 아니거나 이상적이지 않은 컬럼 상호작용을 겪는 경우, 단백질 표준에 기초한 교정 곡선은 유효하지 않으며 용출 부피에서 결정된 분자량이 올바르지 않습니다. 다중 각도 광 산란(MALS)은 기본 물리적 방정식에서 솔루션내 의 해액의 분자량을 결정하는 절대 기술입니다. 분석을 위해 MALS와 분리를 위한 SEC의 조합은 단량체, 토착 올리고머 또는 응집체 및 이종 복합체를 포함한 하나 이상의 단백질 종의 솔루션을 특성화하기 위한 다재다능하고 신뢰할 수 있는 수단을 구성합니다. SEC-MALS는 각 용출 부피에서 측정이 수행되기 때문에 용출 피크가 균질한지 아니면 이질적인지 확인하고 고정 분자량 분포와 동적 평형을 구별할 수 있습니다. 당단백질 또는 지단백질과 같은 변형된 단백질, 또는 세제 용해막 단백질과 같은 접합체의 분석도 가능합니다. 따라서, SEC-MALS는 생물학적 또는 생명 공학 적 연구를 위해 생산 된 분자의 생물 물리학적 특성 및 용액 거동을 확인해야하는 단백질 화학자를위한 중요한 도구입니다. SEC-MALS용 이 프로토콜은 순수 단백질 단량체 및 응집체의 분자량과 크기를 분석합니다. 취득한 데이터는 복합체, 당단백질 및 계면활성제 결합 막 단백질을 포함하여 추가 SEC-MALS 분석을 위한 기초역할을 합니다.