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Biochemistry

Rapamycin/mTOR बातचीत के अध्ययन के लिए एक अर्द्ध मात्रक औषध आत्मीयता उत्तरदायी लक्ष्य स्थिरता (DARTS) परख

Published: August 27th, 2019

DOI:

10.3791/59656

1Department of Orthopaedic Surgery, New York University Medical Center, 2Department of Cell Biology, New York University School of Medicine
* These authors contributed equally

Abstract

दवा आत्मीयता उत्तरदायी लक्ष्य स्थिरता (DARTS) उपन्यास छोटे अणु प्रोटीन लक्ष्य का पता लगाने के लिए एक मजबूत तरीका है. यह ज्ञात छोटे अणु प्रोटीन बातचीत सत्यापित करने के लिए और प्राकृतिक उत्पादों के लिए संभावित प्रोटीन लक्ष्य खोजने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. अन्य तरीकों के साथ तुलना में, DARTS देशी, असंशोधित, छोटे अणुओं का उपयोग करता है और सरल और संचालित करने के लिए आसान है. इस अध्ययन में, हमने प्रोटीन स्थिरता में परिवर्तनों की निगरानी करके और प्रोटीन-लिगन्ड अन्योन्यक्रियाओं की समानता का आकलन करके डार्ट्स प्रयोग की डेटा विश्लेषण क्षमताओं को और बढ़ाया है। प्रोटीन-लिगंड अन्योन्यक्रियाओं को दो वक्रों में प्लॉट किया जा सकता है: एक प्रोटीओलिटिक वक्र और एक खुराक-निर्भरता वक्र। हमने अपने प्रोटोकॉल की स्थापना के लिए एक अनुकरणीय मामले के रूप में MTOR-rapamycin बातचीत का उपयोग किया है। प्रोटीओलिटिक वक्र से हमने देखा कि प्रोनेस द्वारा एमडीओआर का प्रोटीओलिसिस रैपामाइसिन की उपस्थिति से बाधित था। खुराक निर्भरता वक्र हमें rapamycin और MTOR के बंधन संबंध का अनुमान लगाने की अनुमति दी. इस विधि को सही उपन्यास लक्ष्य प्रोटीन की पहचान करने के लिए और दवा लक्ष्य सगाई के अनुकूलन के लिए एक शक्तिशाली और सरल तरीका होने की संभावना है.

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